新一代核心抑制剂3733和4334，相比VBR，对两种机制抑制能力更强

在2023年欧洲肝脏大会上，Assembly Bio公司Kathryn M. Kitrinos博士介绍了一项新研究进展，即下一代HBV核心抑制剂ABI-H3733和ABI-4334，与第一代HBV核心抑制剂相比，在抗病毒活性和cccDNA形成方面的效力和靶标覆盖率都有显著提高。

抑制HBV生命周期中多个步骤，来源EASL2023，Assembly Bio

本研究人员介绍，慢性乙型肝炎病毒感染（cHBV）是一个全球重大健康问题，据估计全球有2.96亿感染者，每年造成约82万人死亡，主要是由于肝硬化和肝细胞癌。HBV核心抑制剂，是一类具有提高cHBV治愈率潜力的新型小分子药物。这些药剂作用机制（MOA）包括：

1、前基因组（pg）RNA封装，防止新病毒颗粒形成；2、破坏进入的衣壳，阻止进入的HBV重新形成共价闭合环状DNA（cccDNA）。在1期研究中显示出强大抗病毒活性，在2期研究中联合核苷逆转录酶抑制剂（NrtIs）使用时，增强了抗病毒活性。

与第一代核心抑制剂vebicorvir (VBR)相比，ABI-H3733(3733)和ABI-4334(4334)属于新型下一代核心抑制剂，它们具有更高的抗pgRNA封装和cccDNA形成的体外效力。本研究比较了VBR、3733和4334的人体血浆和肝脏浓度与每种作用机制的蛋白质调整（paEC50s）的关系。

在原代人肝细胞(PHH)中测量了VBR、3733和4334的抗病毒活性。PHH感染HBV并在第0天用化合物治疗。第4天回收细胞，第7天或第8天收获培养物。然后进行了以下测量：用支链DNA法测定细胞内HBVDNA（抗病毒活性），通过酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞外乙型肝炎e抗原(cccDNA预防)。

在使用不含四环素培养基中添加45 mg/mL人血清白蛋白(HSA)和0.7 mg/mL α(1)-酸性糖蛋白(AAG)培养的AD38细胞中检测paEC50。复合治疗4天后，通过定量聚合酶链反应测定细胞内HBVDNA。采用液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)在非临床药代动力学（PK）研究中收集的肝组织进行肝脏浓度测定。通过LC-MS/MS测定临床研究参与者血浆中VBR、3733和4334的浓度，并使用非房室模型分析估计PK参数。

与第一代核心抑制剂VBR相比，下一代核心抑制剂3733和4334在PHH中，能够更强效地抑制pgRNA封装（抗病毒活性）和HBeAg分泌(cccDNA形成)。

VBR、3733和4334在AD38细胞中的血清转移值

研究结果表明，在300 mg QD剂量下，3733和4334的血浆C浓度预计比抗病毒药物高100倍，而VBR的覆盖率达到了1.4倍。3733和4334的血浆Cmin浓度预计是其cccDNA预防paec50的18-48倍，其中4334的覆盖率相对于3733更高。在临床前动物研究中，所有核心抑制剂在肝脏中的药物暴露量均高于血浆。估计3733和4334的肝脏Cmin浓度高于抗病毒活性和cccDNA预防paec50的100倍以上，其中4334在两种作用机制中都具有最大的覆盖率。

人血浆和肝脏Cmin及蛋白质调整EC50值之间的比较

与VBR相比，新一代核心抑制剂3733和4334在体外对这两种作用机制的抑制作用更强，尤其是对cccDNA的预防。3733和4334与VBR相比，在抗病毒活性和cccDNA形成方面的人类暴露覆盖率有明显提高，这一点在最近完成的1b期和1a期研究中分别得到证实。